Diagnóstico del linfoma canino: cuando la citología por sí sola no es suficiente
La evaluación citológica de muestras de aspiración con aguja fina de ganglios linfáticos periféricos agrandados es una herramienta de diagnóstico inicial relativamente fácil, mínimamente invasiva y económica cuando se sospecha de linfoma periférico. Se remite a los lectores a un artículo para una revisión sobre la evaluación citológica de los ganglios linfáticos periféricos. Sin embargo, la evaluación citológica tiene limitaciones que pueden dificultar un diagnóstico definitivo de linfoma (ver Tabla 1). Incluso los frotis perfectamente preparados y altamente celulares no siempre brindan un diagnóstico definitivo. No importa por qué, siempre te dan ganas de lanzar el puño al aire y exigir saber por qué tú, tu paciente y tu cliente no pueden tomar un descanso. Deja salir la frustración. Este artículo analiza las tres pruebas diagnósticas más utilizadas cuando no se puede llegar a un diagnóstico citológico definitivo de linfoma canino, 1) evaluación histopatológica, 2) inmunofenotipado y 3) PCR para reordenamiento del receptor de antígeno (PARR). A pesar del uso generalizado de la citología, la evaluación histológica de la arquitectura ganglionar sigue siendo el mejor método para diferenciar las poblaciones linfoides reactivas de las neoplásicas.
También se puede determinar el subtipo histológico exacto, que puede tener implicaciones pronósticas. Por ejemplo, el linfoma difuso de células B grandes (Figura 1) se puede diferenciar del linfoma folicular (Figura 2). Ambos linfomas están compuestos principalmente de células B más grandes. Sin embargo, el linfoma folicular canino tiene un curso clínico indolente con un tiempo de supervivencia informado que a veces supera los dos años. Por el contrario, el tiempo de supervivencia promedio informado para el linfoma difuso de células B grandes canino es de aproximadamente 6 meses. La evaluación histológica también puede tener varios inconvenientes, como la invasividad de la escisión quirúrgica, cierto retraso asociado con el procesamiento del tejido y un costo relativo más alto. Además, la evaluación de secciones estándar teñidas con hematoxilina y eosina solas no puede determinar si el linfoma es de origen de células B o T. También hay casos en los que no se pueden diferenciar las poblaciones de linfocitos reactivos y neoplásicos. La inmunofenotipificación y PARR, respectivamente, abordan estas limitaciones. La inmunofenotipificación se refiere al uso de anticuerpos para detectar la expresión de proteínas en las células.
Es importante señalar que el inmunofenotipado no reemplaza la evaluación histológica y/o citológica de los ganglios linfáticos periféricos. Tampoco debe utilizarse como prueba independiente para diferenciar entre poblaciones linfoides neoplásicas y reactivas. En cambio, el inmunofenotipado es una herramienta de diagnóstico complementaria utilizada para determinar el tipo de población de linfocitos neoplásicos presente. En el contexto del linfoma canino, se usa con mayor frecuencia para determinar si un linfoma es de origen de células B o de células T. Los linfomas caninos de origen de células T tienden a tener un pronóstico más precario que los de origen de células B.. El linfoma canino de la zona T es una notable excepción a esta regla, ya que tiene un curso clínico indolente con tiempos de supervivencia a menudo de dos a cuatro años informados en la literatura. La inmunofenotipificación se puede realizar mediante tinción inmunohistoquímica en muestras histológicas (Figura 3) o mediante citometría de flujo. Se remite a los lectores a un artículo para obtener más información sobre el uso de la citometría de flujo para la inmunofenotipificación.
A diferencia del inmunofenotipado, la PCR para el reordenamiento del receptor de antígeno (PARR) se usa para diferenciar entre poblaciones de linfocitos reactivos y neoplásicos. PARR es también una prueba diagnóstica complementaria a la evaluación citológica y/o histológica. Es importante tener en cuenta que no debe utilizarse como un diagnóstico independiente en lugar de la evaluación tradicional de la morfología celular y/o la arquitectura ganglionar. Cada linfocito tiene un código genético único para su receptor de antígeno, ya sea un receptor de células T para las células T o un receptor de inmunoglobulina (anticuerpo) para las células B. Dado que las poblaciones linfoides neoplásicas se derivan de clones de un solo linfocito neoplásico, la presencia de un solo La secuencia de ADN del receptor de antígeno apoya el diagnóstico de linfoma. Sin embargo, esta prueba tiene importantes limitaciones. Primero, una cantidad suficiente de ADN representativo de toda la población linfoide debe estar disponible para la prueba para evitar resultados falsos positivos o falsos negativos. También se han notificado falsos positivos en casos de ehrlichiosis canina y tumores de origen macrófago/histiocítico.