Autómatas de citología urinaria
La mayoría de los laboratorios ahora usan autómatas para el conteo de elementos urinarios. Desde hace algunos años existen varios autómatas (Cuadro 10), cuentan leucocitos, glóbulos rojos, bacterias, células epiteliales, cristales y cilindros. Sin embargo, estos autómatas no permiten diferenciar entre bacterias muertas y bacterias vivas. Por eso siempre es necesario contar los gérmenes urinarios cultivándolos. SediMAX e IRIS iQ200 tienen la ventaja de estar acoplados a un microscopio, lo que permite visualizar los elementos urinarios, identificarlos y clasificarlos. El operador puede entonces intervenir y hacer modificaciones directamente en la pantalla, eliminar artefactos y validar viendo todos los elementos urinarios detectados como en un microscopio. UF-1000i no permite el control de imagen, pero dispara alarmas solicitando controles microscópicos manuales. Los primeros citómetros de flujo solo podían hacer una cosa: contar células. El principio era desplazar las celdas frente a un haz de luz: cada paso de la celda hacía que el haz se apagara.
Al contar el número de extinciones, obtuvimos el número de células. Entonces, una mejora fue aplicar una corriente eléctrica en el flujo que contenía las celdas. RHODE ISLAND). Al contar el número de picos de cambios de voltaje, obtenemos el número de celdas pero también el tamaño de cada celda. De hecho, la resistencia, y por lo tanto el voltaje, es proporcional al tamaño de la celda. Por lo tanto, es posible diferenciar varias poblaciones celulares de una misma mezcla. La segunda gran mejora proviene del uso del rayo láser: el número de criterios estudiados se vuelve entonces muy grande. En este caso, las células que pasan por delante de este haz monocromático absorben parte de esta potente energía luminosa y la vuelven a emitir en forma de varias energías luminosas de diferentes longitudes de onda. El análisis de esta permite diferenciar y clasificar una gran cantidad de elementos. Además, es posible tratar los elementos, antes de que pasen por el láser, con “marcadores” como fluorocromos adheridos o no a anticuerpos.
Revelar estos marcadores permite una mayor discriminación de los elementos. Así, asociando un máximo de criterios, es posible distinguir un gran número de elementos diferentes contenidos en un mismo flujo. El UF-1000i es un autómata para el análisis por citometría de flujo fluorado de partículas urinarias. Permite la enumeración de glóbulos rojos, leucocitos, células epiteliales, bacterias, cilindros y dispara alarmas cuantitativas para cilindros patológicos, levaduras, células redondas pequeñas, espermatozoides y cristales. También indica el volumen de glóbulos rojos, lo que permite localizar el origen de la hematuria (glomerular o no glomerular). El análisis se realiza directamente sobre orina entera sin preparación previa. Los elementos urinarios se tiñen con dos fluorocromos específicos (uno para bacterias y otro para otras partículas). Un líquido (líquido de Sheath) se los lleva y los hace pasar uno a uno por un estrecho canal por el que pasa un rayo láser. A continuación, el autómata analiza la luz láser dispersada, la fluorescencia y la impedancia y así diferencia los diferentes elementos urinarios.
Por lo tanto, cada partícula se diferencia según 3 parámetros: tamaño, estructura y fluorescencia. Se realizan dos controles de calidad internos antes y al final de cada serie de pacientes: un control alto y un control bajo. Estos diagramas de dispersión son nubes de puntos que representan las partículas urinarias diferenciadas según su tamaño, su composición y su fluorescencia. Los parámetros del análisis cuantitativo muestran que se han alcanzado los umbrales de leucocitos, bacterias y glóbulos rojos (alertas que se muestran en amarillo en la pantalla). La presencia de una gran nube de leucocitos (en azul en el Scattergram S2) y bacterias (en rosa en el Scattergram B1), desencadenando la información: “¿ITU? Infección del tracto urinario). El autómata invita al técnico a asegurarse de que efectivamente se trata de una infección del tracto urinario. También visualizamos en el diagrama de dispersión S1, la nube de glóbulos rojos, lo que indica hematuria. Valoración: ECBU positivo (bacteriuria positiva, leucocituria positiva) con hematuria. Tenga en cuenta que el diagnóstico de certeza de infección del tracto urinario requiere un recuento de gérmenes por cultivo.
El SediMAX es un analizador de citología urinaria totalmente automatizado basado en el análisis morfológico de partículas después de su captura por un sistema de video. Realiza una medición microscópica de la muestra de orina centrifugada en una cubeta de un solo uso. Puede procesar 80 muestras por hora. Los tubos que contienen la orina del paciente se colocan en el autómata. Este último los homogeneiza antes del análisis. Luego, el autómata aspira 200 µL de orina, los transfiere a la cubeta donde se centrifugan, lo que permite sedimentar los elementos. La cámara integrada en el autómata fotografía la cubeta en varios lugares (hasta 20 imágenes por muestra) a través de un microscopio. Las imágenes se muestran en la pantalla: son exactamente las que se observan con los microscopios tradicionales, con la posibilidad de hacer zoom (aumento de hasta 250x, zoom óptico de 20x) en partículas individuales. Después del análisis, la pantalla muestra los resultados. El técnico tiene entonces la opción de validarlos o modificarlos. Los controles de calidad internos (nivel bajo y nivel alto) se pasan antes y después de cada serie de pacientes. El dispositivo verifica que los glóbulos rojos y los leucocitos estén dentro del rango de concentración establecido.