Asunto: Controles citológicos IHC
Judith, Por supuesto, los controles ideales para las muestras de citología IHC son las muestras de citología. No es tan difícil mantener un lote de cytospins en el congelador para este propósito. Lo segundo mejor, y a lo que generalmente tenemos que recurrir, son las secciones congeladas, estas requieren un poco más de tiempo y esfuerzo para cortarlas y almacenarlas. Las secciones de parafina deben ser el último recurso y sus muestras de citología no necesitan AYER. Ya está comparando manzanas y naranjas cuando usa secciones de parafina como controles para casos de citología, no está igualando las cosas en este punto al tratar los dos tipos de muestras de la misma manera. Como decía nuestro ex jefe, usar controles de parafina para las muestras de citología solo asegura que “el anticuerpo no está muerto”. Además, hemos descubierto que, en general, necesitamos concentrarnos más con nuestro anticuerpo para muestras congeladas y citológicas; el uso de controles de parafina no le indica si tiene un protocolo optimizado para la muestra de su paciente, que es una sección congelada o una muestra de citología. Necesitamos saber cómo manejan las personas los portaobjetos de citología para IHC. AYER en estas diapositivas.
Las células presentes en los fluidos pleural, pericárdico y peritoneal normales incluyen un bajo número de células mesoteliales y, en ocasiones, células inflamatorias. Las células mesoteliales están presentes en pequeños grupos o como individuos. Si se separan del revestimiento de la cavidad durante el proceso de recolección, las células mesoteliales se parecen a las células escamosas con una relación N/C baja y abundante citoplasma débilmente basófilo. Históricamente, las células con esta morfología se han denominado células mesoteliales "pálidas". Las células mesoteliales normales que están presentes en el líquido antes de la recolección son redondeadas y bastante basófilas (células mesoteliales “oscuras”). Miden entre 25 y 35μ de diámetro. Los núcleos están ubicados en el centro, redondos y uniformemente granulados. El citoplasma es abundante. La característica más llamativa de estas células es la presencia de un borde en cepillo periférico eosinofílico o "falda". Las células inflamatorias presentes en los fluidos normales tienen la morfología de los leucocitos normales de sangre periférica. El glóbulo blanco predominante observado varía según la especie. En perros y caballos, los neutrófilos son frecuentes. En gatos y bovinos predominan los linfocitos.
La morfología celular de los trasudados verdaderos es similar a la del líquido normal; como se ha señalado anteriormente, la principal alteración de la trasudación es el aumento del volumen de líquido. El principal constituyente celular del trasudado modificado (incluso del derrame pseudoquiloso) es la célula mesotelial reactiva. Debido a la capacidad de las células mesoteliales para responder a la irritación con proliferación, la presencia de un mayor número de grupos y balsas de células mesoteliales es un hallazgo común en la reactividad. Las mitosis están aumentadas y ocasionalmente se observan células mesoteliales reactivas multinucleadas. Las células mesoteliales reactivas en racimo pueden absorber lípidos del líquido de efusión y, cuando lo hacen, adquieren las características de las células secretoras. De esta forma, deben diferenciarse del adenocarcinoma metastásico o del mesotelioma primario. Esto se hace mediante la evaluación crítica de las poblaciones celulares en busca de criterios de malignidad. Las células mesoteliales reactivas también pueden adoptar una variedad de otras morfologías. Las células mesoteliales individuales mudadas en derrames pierden gradualmente su borde en cepillo y pueden desarrollar habilidades fagocíticas, acumular desechos intracelulares y volverse indistinguibles de los macrófagos.
A medida que maduran los trasudados modificados, aumenta la proporción de células inflamatorias que contienen. En la mayoría de los casos, la principal célula inflamatoria es el neutrófilo no degenerado, pero los neutrófilos rara vez representan más del 30% de la población celular total. A medida que los trasudados modificados se vuelven citológicamente indistinguibles de los exudados no específicos de bajo grado mezclados con exudados de macrófagos. Los derrames inflamatorios se clasifican de acuerdo con las reglas estándar de inflamación como neutrofílicos, mixtos o macrófagos. En las reacciones de neutrófilos, predominan los neutrófilos (no degenerados o degenerados). Las reacciones mixtas se caracterizan por una mezcla de neutrófilos y macrófagos, y en la inflamación de los macrófagos, los macrófagos son las células predominantes observadas. Los derrames inflamatorios son por su naturaleza irritantes para el revestimiento de las cavidades corporales en cuestión. Por lo tanto, prácticamente todos los derrames inflamatorios se caracterizan por algún grado de hiperplasia de células mesoteliales reactivas. Debido a la tendencia de las células mesoteliales reactivas a fusionarse citológicamente con el continuo monocitos/macrófagos, se las considera parte del componente crónico de cualquier derrame inflamatorio.
La mayoría de los derrames inflamatorios son citológicamente inespecíficos en términos de diagnóstico etiológico. Sin embargo, al igual que con las respuestas inflamatorias en otros lugares, la morfología citológica proporciona pistas importantes sobre la causa subyacente. Los derrames neutrofílicos inflamatorios indican irritación severa. Si los neutrófilos están degenerados, se debe hacer un esfuerzo para identificar los organismos bacterianos en los fagocitos. Esto suele ser más fácil en el borde biselado del frotis. Si no hay organismos visibles, el líquido aún debe ser cultivado. Los derrames mixtos y de macrófagos reflejan una irritación menos intensa y se encuentran con la resolución de los derrames neutrofílicos o en asociación con agentes causales que son menos irritantes que las bacterias (p. ej., organismos fúngicos o cuerpos extraños). Si bien la mayoría de los derrames inflamatorios son citológicamente inespecíficos, algunas etiologías provocan reacciones con una morfología característica. Estos derrames se analizan a continuación. La peritonitis infecciosa felina es única entre las causas de derrame inflamatorio en que el líquido que se acumula es de baja celularidad. La clasificación como derrame inflamatorio se basa exclusivamente en la presencia de una proteína total extremadamente elevada que refleja una elevación similar en la proteína sérica.