Citología para Técnicos (Actas)

La clave para la recolección exitosa de fluidos de las cavidades corporales es el posicionamiento cuidadoso del bisel de la aguja a medida que se ingresa a la cavidad y comienza la aspiración. El bisel de la aguja siempre debe apuntar hacia la pared del cuerpo. Esto evita que la grasa omental o los pulmones obstruyan la abertura de la aguja. Si la aspiración inicial produce un golpe seco, se libera la presión negativa, se gira la jeringa 360° y se intenta de nuevo la aspiración. Después de la extirpación de una masa, la citología aún se puede utilizar para establecer un diagnóstico o para proporcionar información útil en espera de la interpretación histopatológica. Las masas extraídas se pueden aspirar al igual que las masas in vivo y se pueden hacer preparaciones de calabaza. Otras dos técnicas son particularmente adecuadas para masas extirpadas: frotis de impresión y raspados. Hay tres claves para hacer buenos frotis de impresión: 1) siempre use una superficie recién cortada que se haya secado sobre una superficie absorbente, 2) asegúrese de que la superficie cortada sea pequeña (menos de 1,0 cm2) y 3) haga varias impresiones en la misma diapositiva.

Las impresiones se toman tocando suavemente la superficie cortada de una masa o lesión en un portaobjetos de microscopio estacionario y luego levantando el tejido verticalmente sin dejar manchas. Se pueden hacer de dos a tres filas de muescas (8-15 muescas)/diapositivas y se pueden hacer múltiples diapositivas a partir de la misma superficie de corte. No todas las superficies cortadas exfoliarán fácilmente las células. Los tejidos compuestos por células epiteliales o células redondas discretas (ganglio linfático, bazo, tumor de mastocitos, etc.) se pueden imprimir fácilmente, pero las masas compuestas de tejido conectivo generalmente no se pueden modificar mediante citología de frotis de impresión. Cuando la impresión no es exitosa, se pueden usar técnicas de raspado. Las preparaciones para raspar se hacen raspando una superficie recién cortada con una hoja de bisturí. El material que se acumula en el portaobjetos se desliza suavemente a lo largo de un portaobjetos de microscopio. Solo se hace una secuencia; la cuchilla no se mueve de un lado a otro a través del material revestido. El portaobjetos se seca al aire y se tiñe como estándar.

Una vez realizadas las preparaciones citológicas, deben teñirse adecuadamente antes de poder interpretarlas. Históricamente se han defendido varias tinciones y procedimientos diferentes. La tinción de citología más fácil de usar es el nuevo azul de metileno, una tinción vital de un solo paso. El nuevo azul de metileno es una buena tinción nuclear que permite una evaluación rápida de los criterios de malignidad. Un inconveniente importante de la mancha es que no es permanente y, por lo tanto, no se puede pasar a una segunda opinión. En el otro extremo del espectro, cuando se trata de la facilidad de uso, se encuentran las manchas tipo papanicolaou. Estas tinciones se han utilizado durante mucho tiempo en citología humana pero no ofrecen ningún interés real en citología veterinaria. Estas manchas requieren una fijación húmeda y varias soluciones de tinción diferentes. Además, no son particularmente efectivos para teñir microorganismos. Por estas razones, el autor no recomienda su uso. En su lugar, el autor recomienda el uso de tinciones hematológicas estándar: tinción de Wright, Wright's-Giemsa, Wright's-Leishmann, etc. En los últimos años, se han desarrollado algunas modificaciones rápidas y sencillas de estas tinciones hematológicas (Harleco's Diff-Quik, Camco Quick Stain, etc.) y han revolucionado la citología veterinaria de diagnóstico.

Deben tenerse en cuenta varios factores al preparar portaobjetos con tinciones hematológicas. En primer lugar, todos los portaobjetos deben mantenerse alejados de la formalina antes de teñirlos. Incluso los vapores de formalina fijan parcialmente los portaobjetos e interfieren con la tinción. Si las muestras no teñidas deben enviarse por correo a un laboratorio para su procesamiento, ni siquiera deben enviarse en el mismo paquete que las muestras fijadas con formalina. Además, siempre que se envíen portaobjetos para tinción con tinciones de hematología de rutina, no deben fijarse en alcohol antes del envío. La fijación con alcohol solo debe realizarse inmediatamente antes de la tinción. Una vez que la muestra de citología se ha recolectado y teñido correctamente, está lista para ser examinada bajo el microscopio. Las funciones principales del citólogo son reconocer y clasificar las reacciones inflamatorias para identificar cualquier agente etiológico que pueda haber causado la inflamación y reconocer la presencia de células malignas. La interpretación citológica comienza con la evaluación adecuada de los portaobjetos. Diferentes tipos de especímenes requieren diferentes enfoques.

Por ejemplo, los frotis líquidos se hacen de la misma manera que los frotis de sangre periférica y, por lo tanto, tienen un área gruesa (cerca del punto de aplicación de la muestra), una monocapa (hacia el centro del frotis) y un borde biselado (la zona más alejada del punto de aplicación de la muestra). punto de aplicación de la muestra). punto de aplicación). Cuando se examinan frotis líquidos, se evalúan las tres áreas del frotis, primero a bajo aumento y luego bajo inmersión en espiral. Cada área es examinada por diferentes características. Por ejemplo, el área más importante para evaluar la morfología celular es la monocapa. Las partículas grandes, las células grandes o las células que contienen material fagocitado generalmente se encuentran en la parte gruesa del frotis o en el borde de la pluma. Por lo tanto, en el caso de las reacciones inflamatorias, la clasificación requiere la integración mental de los números relativos de los diferentes tipos de células que se observan en la monocapa y en el borde de la pluma (consulte Citología inflamatoria a continuación). Dado que los neutrófilos se concentran en la monocapa y los macrófagos en el borde de la pluma, es fácil entender que el examen de una sola área puede conducir a una mala interpretación de la respuesta citológica.