Hola amigos de Histo: necesitamos saber cómo manejan las personas los portaobjetos de citología para IHC. Siempre colocamos los portaobjetos de prueba de citología (preparaciones finas, frotis, etc.) con nuestros portaobjetos quirúrgicos (FFPE) y AYER (vapor) con controles de tejido para citologías. Las cirugías se montan en la corredera de control. Nos damos cuenta de que nuestras citologías están fijadas en ETOH al 95 % y realmente no requieren HIER, pero como solo tenemos portaobjetos de control de tejido, los sometemos al mismo tratamiento que nuestros controles FFPE. Para reducir cualquier ruido de fondo en las citologías, se nos dijo que no hiciéramos AYER en estos portaobjetos. Desafortunadamente, solo tenemos controles de tejido y estos requieren HIER, lo que disminuye su valor como verdaderos controles con citologías que no obtienen HIER. Realmente no queremos entrar en la ardua tarea de mantener los portaobjetos de control de preparación de citología si no es necesario. ¿Alguno de ustedes, POR FAVOR, puede ponerse en contacto conmigo para averiguar cómo manejan las pruebas de citología y los portaobjetos de control?
VNJ 27-187-188). El propósito de este artículo es presentar a las enfermeras veterinarias la citología de fluidos de la cavidad corporal. Cubrirá las técnicas de preparación de fluidos para maximizar los beneficios de diagnóstico para el veterinario o el patólogo. Las cavidades del cuerpo, la pleura y el peritoneo, por ejemplo, están revestidas con membranas cubiertas con una sola capa de células mesoteliales. En circunstancias normales, se produce una pequeña cantidad de líquido en las cavidades, pero normalmente se reabsorbe en el sistema linfático. • aumento de la presión arterial debido a la sobrecarga de líquidos y congestión disminución del drenaje linfático debido a inflamación, congestión u obstrucción. Las muestras de fluidos generalmente se toman por abdominocentesis o toracocentesis, pero también se pueden tomar de masas quísticas que se encuentran en varias áreas del cuerpo. Luego, la muestra de líquido debe dividirse y colocarse en un tubo de sangre con EDTA, además de un tubo estéril normal en caso de que se necesite un cultivo. Es importante llenar el tubo de EDTA hasta el nivel correcto porque el anticoagulante puede afectar la forma y el tamaño de las células, además de diluir el número de células.
Primero realice un frotis directo usando la técnica de frotis de sangre o la técnica de concentración lineal descrita en la Parte 1 (VNJ 27: 187-188). Si hay "flotadores" (floculados), estos deben eliminarse con cuidado y prepararse utilizando la técnica de trituración descrita anteriormente. Estos frotis deben dejarse secar al aire antes de teñirlos o envasarlos para enviarlos a un laboratorio externo. Esta técnica es muy similar a la utilizada para la preparación de preparaciones de sedimento urinario. Coloque la muestra líquida en un tubo regular, como un tubo Eppendorf, y centrifugue la muestra a 3000 rpm durante aproximadamente tres a cinco minutos. Las velocidades exactas se pueden ajustar para adaptarse a su exprimidor individual. La forma más eficiente de preparar líquido hipocelular, como el LCR, es usar una centrífuga de citocentrifugación, pero es posible que no esté disponible en muchas prácticas. Una vez centrifugado, se elimina la mayor parte del sobrenadante, el sedimento se resuspende y luego se unta en un portaobjetos de microscopio utilizando el método de frotis de sangre o el método concentrado en línea.
Estos portaobjetos deben dejarse secar al aire. Para muestras como LCR, donde los niveles de células serán muy bajos, es mejor colocar una gota de sedimento en un portaobjetos de microscopio y dejar que se seque. Ya se conoce la zona en la que se encontrarán las células, lo que facilita mucho el examen. Luego, los portaobjetos deben teñirse de acuerdo con su protocolo interno o enviarse sin teñir a su laboratorio externo para su revisión. La evaluación cuantificada normalmente se centra en los recuentos de glóbulos rojos y nucleados, así como en los niveles de proteínas y, si es necesario, los niveles de triglicéridos y colesterol. Se pueden usar analizadores automáticos para realizar recuentos de células, pero no siempre son confiables porque no permiten la presencia de coágulos y no son muy precisos para fluidos con muy pocas células, como el LCR. Los recuentos manuales deben realizarse utilizando una cámara de recuento, como un hemocitómetro Neubauer mejorado. Si la muestra es muy celular o turbia, el líquido debe diluirse con un tampón o líquido de dilución de glóbulos blancos, si solo está interesado en el recuento de células nucleadas (NCC).
La dilución exacta no importa siempre que se conozca y las células sean individualmente visibles y contables en la cámara utilizada. En esta etapa, no se hace distinción entre glóbulos blancos inflamatorios y células tisulares como las células mesoteliales; en cambio, se llama simplemente recuento de células nucleadas. La proteína total se puede medir usando un analizador químico automatizado o un refractómetro. Se mide fácilmente a través de un refractómetro usando el mismo método que la gravedad específica de la orina pero usando una escala separada. El valor de proteína obtenido debe multiplicarse por 10, ya que los niveles suelen expresarse en g/1 y las escalas suelen leerse en g/dl. Los resultados así obtenidos son rápidos y sencillos, pero no siempre fiables y pueden verse afectados por la hemólisis y la presencia de lípidos en el quilo. Si es posible, es preferible pasar una proteína total y una albúmina en un analizador de bioquímica. En este punto sería prudente mencionar los derrames de aspecto blanco y opalescente.